Hesablama identifikasiyası və eksperimental validasiya spinal əzələ atrofiyasında erkən qlisinerg pozuntularında

Spinal Muscular Atrophy (SMA) - sağ qalma motor nevronu 1 (SMN1) genində mutasiya və ya silinmə səbəbindən aşağı motor nevron (MN) itkisi ilə xarakterizə olunan mütərəqqi bir nevrodegenerativ pozğunluqdur. Artan sübutlar, bu orqanellərin potensial müalicə hədəfləri olduğunu göstərən SMA-da mitoxondriyalı pozğunluqlara səbəb olur. Mikroray əsaslı gen ifadəsi məlumatlarının bioinformatik analizi vasitəsilə, bir sıra siçan toxumaları və hüceyrə xəttlərindən alınan (SMN-də xüsusi mutasiya olunmamış) səkkiz mitokondriyal genin müəyyənləşdirildi, bu da SMN-lə əlaqəli yollarla əlaqəli ola bilər. Onların arasında glisin bölünmə sisteminin (GCS) bir alt hissəsini kodlayan Gcsh (glycin bölünmə sistemi protein H) eksperimental təsdiqləmə ilə təsdiqləndi ki, SMN funksiyasının itirilməsindən sonra faktiki olaraq tənzimlənmədən sonra. Ciddi SMNΔ7 siçan modelində, Qərb Blot Proteinləri səviyyəsində ümumi lizatda əhəmiyyətli dərəcədə artımlara baxmayaraq, QHT- n miqdarlı real vaxt PCR ilə qoruyucu sırt dənəsində Gcsh- nin erkən simptomatik mərhələsində (doğanlıqdan sonrakı gün 5, P5) güclü bir şəkildə tənzimlənməsini ortaya qoyduq. Bundan əlavə, RNA-Scope in-situ hibridləşdirilməsi MN soma-da Gcsh ifadəsinin əhəmiyyətli dərəcədə artdığını göstərdi və immunofluoresans bu tapıntıları təsdiqlədi və həm MNs-də, həm də astrocitlərdə yüksələn GCSH proteini ortaya çıxdı. Astrocitlərlə əlaqəli glisin transporterin GlyT1 -nin əhəmiyyətli dərəcədə aşağı tənzimlənməsini, eyni zamanda neyron presinaptik transporterin GlyT2 -nin az və əhəmiyyətli dərəcədə artmasını göstərdik. Bu nəticələr xəstəliyin inkişafı zamanı glisinergik dəyişikliklərin davamlılığını təsdiq edən son simptomatik mərhələdə (P12) daha da araşdırıldı. Nəhayət, Renshaw hüceyrələrinin (qlisinergik interneuronlar) morfoloji tədqiqatları (təkrarlanma inhibition üçün vacib) P5-də erkən morfoloji dəyişikliklər aşkar etdi, bu da son simptomatik mərhələdə (P12) daha aydın oldu. Bu nəticələr birgə SMA ilə xəstəliyin ilkin mərhələlərində olan qlisinergik sistem disfunksiyası arasında bir əlaqəni göstərir və bu, həyəcan / inhibition balansını təsir edə bilər və MN degenerasiyasına töhfə verir. Nəticədə, nəticələrimiz, SMA patogenesisinə mitoxondriyalı töhfələrin aydınlaşdırılması və yeni müalicə imkanlarını aşkar etmək üçün GCS ifadəsi/aktivliyi və glisinergik yolları daha da araşdırılması zərurətini vurğulayır.

DnaJ istilik şoklu protein ailə üzvü C5

Glyceraldehyde-3-fosfat dehidrogenase

Kvantitativ əks transkripsiya polimeraz silsilə reaksiyası

Natrium dodecil sulfatpolyakrillamid jel elektroforesi

Fosforlaşdırılmamış neurofilament H antikor markerləri